Аутоімунні захворювання в організмі людини
Аутоімунні захворювання в організмі людини виникають, коли організм починає піддаватися різноманітної атаці власних антитіл. В наш час є ряд різних лабораторних досліджень для проведення їх діагностики. Імунні реакції, включаючи виробництво антитіл, в нормі розвиваються тільки проти чужорідних антигенів (речовин, які організм сприймає як потенційно небезпечні), таких як бактерії і віруси. Організм зазвичай не реагує на власні антигени.
Відео: «Імунітет»
аутоімунні реакції
З причин, які ще не до кінця вивчені, приблизно у 5% людей імунна система починає виробництво антитіл до власних білків. Ця аномальна реакція призводить до аутоімунних захворювань, таким як ревматоїдний артрит, системний васкуліт, розсіяний склероз і цукровий діабет 1-го типу (інсулінозалежний). Існує цілий ряд лабораторних досліджень, що проводяться пацієнтам з клінічними симптомами, що дозволяють запідозрити аутоімунне захворювання. Однак іммунодіагностіка для постановки діагнозу часто не потрібно. Наприклад, при діабеті 1-го типу діагноз може бути поставлений на підставі визначення рівня глюкози в крові натще.
Відео: До м н, лікар імунолог, Арьяева, Аутоімунні процеси і Трансфер фактор
При багатьох аутоімунних захворюваннях виявлення аутоантитіл (вироблених проти власних білків) використовується в якості допоміжного способу діагностики. Для цього проводиться аналіз крові. Для виявлення аутоантитіл зразок крові центрифугируется (обробляється в спеціальному апараті, який розділяє частинки різної щільності на шари). При цьому сироватка, яка містить антитіла, відділяється від кров`яних клітин. Для виявлення аутоантитіл в сироватці крові використовується кілька різних методів. Титром називають граничне розведення проби сироватки крові, при якому антитіла все ще визначаються. Відносно мала кількість аутоантитіл (титр приблизно 1:10) часто зустрічається у здорових людей і не вважається небезпечним.
Одним з найпростіших методів дослідження є реакція латекс-аглютинації. З її допомогою визначається здатність сироватки пацієнта агглютинировать (склеювати) малі гранули полістиролу латексу, покриті власними антигенами. При додаванні сироватки крові аутоантитілапроти власних молекул склеюються і випадають в осад (агглютаніруют). Реакція латекс-аглютинації використовується для визначення певного типу аутоантитіл, званих ревматоїдним фактором, характерних для ревматоїдного артриту. Вони атакують інші антитіла, особливо імуноглобуліни класу IgG, і, отже, можуть бути виявлені шляхом застосування латексних гранул, покритих підігрітими антитілами IgG.
Розчини сироватки хворого і латексних гранул змішуються на предметному склі і потім досліджуються на предмет аглютинації. Титри антитіл 1:80 і вище, як правило, вважаються клінічно значущими. Даний аналіз проводиться для підтвердження діагнозу ревматоїдного артриту у пацієнтів з відповідними клінічними симптомами, проте сам по собі він не є достатньо достовірним, так як ревматоїдний фактор може бути присутнім в крові і при інших захворюваннях. При иммуноферментном аналізі (ІФА) використовується фермент, який викликає зміну кольору в розчині. Цей тест проводиться для виявлення аутоантитіл при ряді аутоімунних захворювань. Власні антигени наносяться на 96-ямковий титру-ційний мікропланшет. Сироватка крові пацієнта додається в лунки і залишається на одну годину, протягом якого відбувається зв`язування аутоантитіл з власними антигенами.
Мікропланшет промивається, після чого на ньому залишаються тільки аутоантитіла, а все інші антитіла видаляються. Наявність аутоантитіл виявляється за допомогою спеціальних вторинних антитіл, які зв`язуються з людськими аутоантителами з приєднанням ферменту. Вторинне антитіло додається в кожну лунку. При подальшому промиванні вільні вторинні антитіла видаляються. У лунках залишаються лише антитіла, пов`язані з людськими аутоантителами, прореагувати з власними антигенами, а також прикріплені до них ферменти. При додаванні речовини, що вступає у взаємодію з ферментом, спостерігається зміна забарвлення, і тест вважається позитивним. Чим інтенсивніше колір, тим більше аутоімунних антитіл присутній в даному розчині сироватки крові.
Вторинні антитіла використовуються в імунологічних тестах для виявлення людських аутоантитіл. Вони виробляються шляхом імунізації тварин, наприклад овець, людськими антитілами. Імунна система овець реагує на це шляхом утворення овечих антитіл проти антитіл людини. Вони очищаються від овечої крові, а потім позначаються молекулою, наприклад ферментом або флюоресцентним барвником, що дозволяє їх виявити. Третій широко застосовуваний тип дослідження заснований на методі імунофлюоресценції. Зразки сироватки крові пацієнта додаються на тонкі зрізи тканин нормальних органів на предметному склі.
Потім скло знову промивають, щоб видалити вільні вторинні антитіла, і досліджують за допомогою спеціального флуоресцентного мікроскопа з метою виявлення аутоантитіл. Метод іммунофлюоресцен-ції дозволяє одночасно розміщувати на предметне скло зрізи декількох різних тканин (наприклад, серця, нирок і щитовидної залози). За цим початковим скринінгом при необхідності можуть послідувати більш детальні тести, наприклад ІФА, який дозволяє ідентифікувати окремі антигени.
